خطوات الاستخدام
الخطوة الأولى: فهم قانون بير-لامبرت (Beer-Lambert Law) هو أساس التحليل الطيفي الكمي. ينص القانون على أن امتصاص الضوء (A) بواسطة محلول يتناسب طردياً مع تركيز المادة الماصة (c) وطول مسار الضوء (b) ومعامل الامتصاص المولي (ε). المعادلة هي A = ε * b * c. هذه العلاقة خطية عند التركيزات المنخفضة، مما يجعلها أداة قوية لتحديد تركيز المواد في المحاليل. قبل البدء، تأكد من فهم المتغيرات الثلاثة: ε خاص بكل مادة عند طول موجي معين، b هو المسافة التي يقطعها الضوء عبر المحلول (عادةً عرض الخلية)، وc هو التركيز المولي. يجب أن تكون الوحدات متسقة: ε بوحدة L mol⁻¹ cm⁻¹، b بوحدة cm، وc بوحدة mol/L.
الخطوة الثانية: إدخال معامل الامتصاص المولي (ε). هذه القيمة تمثل قدرة المادة على امتصاص الضوء عند طول موجي محدد. تختلف ε من مادة إلى أخرى وتعتمد على طول الموجة. على سبيل المثال، للبروتينات عند 280 nm، ε يتراوح بين 10,000 و 50,000 L mol⁻¹ cm⁻¹. يمكنك العثور على ε من الجداول القياسية أو الأدبيات العلمية. إذا كنت تحسب التركيز من امتصاصية مقاسة، ستحتاج إلى معرفة ε للمادة. تأكد من استخدام القيمة الصحيحة لطول الموجة المستخدم في القياس.
الخطوة الثالثة: إدخال طول مسار الضوء (b). عادةً ما يكون طول مسار الضوء هو عرض الخلية (كوفيت) المستخدمة في المطياف. الخلايا القياسية لها عرض 1 سم، ولكن قد تستخدم خلايا بأطوال مختلفة (مثل 0.5 سم أو 2 سم) لتحسين الدقة. قيمة b تؤثر خطياً على الامتصاصية: مضاعفة طول المسار تضاعف الامتصاصية. لذلك، من الضروري إدخال القيمة الصحيحة. إذا كنت تستخدم خلية بعرض مختلف، قم بقياسها أو الرجوع إلى مواصفات الجهاز.