خطوات الاستخدام
الخطوة الأولى: جمع البيانات التجريبية. قم بتجربة إنزيم مع ركيزة بتركيزات مختلفة (مثلاً 0.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 mM) وقس السرعة الابتدائية v (مثل µmol/min) لكل تركيز. سجل القيم في جدول.
الخطوة الثانية: حساب المقلوبات. لكل تركيز ركيزة [S]، احسب 1/[S]. ولكل سرعة ابتدائية v، احسب 1/v. هذه المقلوبات تُستخدم في رسم مخطط المقلوب المزدوج (Lineweaver-Burk).
الخطوة الثالثة: رسم النقاط على محورين (1/[S] على المحور الأفقي، 1/v على المحور الرأسي). ثم احسب أفضل خط مستقيم يمر بالنقاط (باستخدام الانحدار الخطي). معادلة الخط هي: 1/v = (Km/Vmax) * (1/[S]) + 1/Vmax. من الميل (Km/Vmax) ونقطة التقاطع مع المحور الرأسي (1/Vmax) يمكن إيجاد Km و Vmax.
الخطوة الرابعة: استنتاج المعلمات الحركية. نقطة تقاطع الخط مع المحور الأفقي تساوي -1/Km، ونقطة التقاطع مع المحور الرأسي تساوي 1/Vmax. احسب Km = -1/(تقاطع المحور الأفقي)، و Vmax = 1/(تقاطع المحور الرأسي). أيضًا يمكن حساب الميل ومنه Km = الميل × Vmax.