خطوات الاستخدام
قم بإدخال قيمة ميل المنحنى القياسي (slope) الذي تم الحصول عليه من تجربة qPCR. يتم حساب الميل عادةً عن طريق رسم دورة العتبة (Ct) مقابل لوغاريتم التركيز للعينات القياسية. يتراوح الميل المثالي بين -3.1 و -3.6، حيث يعكس ميل -3.32 كفاءة 100%.
أدخل قيمة العتبة (threshold) التي استخدمتها في التحليل. العتبة هي مستوى الإشارة الذي يتم عنده قياس قيمة Ct. يجب أن تكون العتبة ثابتة عبر جميع العينات في التجربة لضمان دقة المقارنة.
اختر ما إذا كنت تريد حساب الكفاءة (Efficiency) من قيمة الميل، أو العكس (حساب الميل من الكفاءة). إذا اخترت حساب الكفاءة، ستستخدم المعادلة: E = 10^(-1/slope) - 1. ثم يمكن تحويلها إلى نسبة مئوية بضربها في 100.
إذا اخترت حساب الميل من الكفاءة المدخلة (على شكل قيمة عشرية، مثلاً 0.95 لكفاءة 95%)، استخدم المعادلة: slope = -1 / log10(1 + efficiency). تأكد من إدخال الكفاءة كرقم عشري (مثلاً 1.0 لكفاءة 100%).