درجة حرارة انصهار DNA

أدخل تسلسل الحمض النووي (DNA) الذي تريد حساب درجة حرارة انصهاره. يجب أن يكون التسلسل مكتوبًا بالأحرف الكبيرة (A, T, C, G) دون أي مسافات أو أحرف إضافية. يمكن إدخال تسلسل يصل طوله إلى 100 قاعدة نيتروجينية أو أكثر، لكن يُفضل ألا يزيد عن 50 قاعدة لضمان دقة الحسابات.

اختر طريقة الحساب المناسبة. الطريقة الأساسية هي طريقة '2×AT + 4×GC' للتسلسلات القصيرة (أقل من 20 قاعدة)، وتستخدم للتقريب السريع. أما للتسلسلات الأطول، فاستخدم طريقة 'SantaLucia' أو 'التعديل الديناميكي الحراري' التي تراعي العوامل الديناميكية الحرارية بدقة أكبر. إذا كنت تستخدم التطبيقات المخبرية الدقيقة مثل تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR)، فاختر الطريقة المتقدمة.

حدد تركيز الأملاح (مثل كلوريد الصوديوم NaCl) وتركيز الحمض النووي (DNA) في المحلول. تزيد الأملاح من ثبات اللولب المزدوج وبالتالي ترفع درجة حرارة الانصهار. تركيز الحمض النووي يؤثر أيضًا: كلما زاد التركيز، زادت درجة الانصهار قليلاً. القيم الافتراضية هي 50 ملي مولار من NaCl و 200 نانو مولار من DNA.

انقر على زر 'احسب' لتحصل على درجة حرارة الانصهار (Tm) بوحدة درجة مئوية (°C). ستظهر النتيجة مع شرح تفصيلي للقيم المستخدمة والصيغة المطبقة. يمكنك أيضًا ضبط المعاملات لإعادة الحساب إذا كانت شروط التجربة مختلفة.

تأكد من أن قيمة Tm المحسوبة مناسبة لتصميم البادئات (primers) في تفاعل PCR. النطاق المثالي لدرجة حرارة التهجين هو حوالي 5-10 درجات مئوية أقل من Tm. إذا كانت Tm عالية جدًا (> 70°C) قد تؤدي إلى ارتباط غير محدد، وإذا كانت منخفضة جدًا (< 50°C) قد لا يحدث الارتباط بشكل فعال.