خطوات الاستخدام
الخطوة الأولى: جهّز العينة واقرأها بالمقياس الطيفي. تأكد من أن عينة RNA نقية وخالية من تلوث البروتين أو DNA، ثم اقرأ الامتصاصية عند 260 نانومتر (A260)؛ فلقواعد النيتروجينية في RNA قمة امتصاص عند هذا الطول الموجي، وكلما زاد الامتصاص زاد التركيز.
الخطوة الثانية: حدد معامل التخفيف. إذا خففت العينة الأصلية بمذيب (مثل الماء الخالي من النيوكلياز) فمعامل التخفيف هو مقلوب نسبة التخفيف: إضافة 10 ميكرولتر عينة إلى 90 ميكرولتر مذيب تعطي حجما كليا 100 ميكرولتر فيكون المعامل 100÷10 = 10، والعينة غير المخففة عاملها 1.
الخطوة الثالثة: طبق الصيغة – تركيز RNA (ميكروغرام/مل) = A260 × 40 × معامل التخفيف. الرقم 40 مشتق من معامل انطفاء RNA الكتلي (25 L·g⁻¹·cm⁻¹ تقريبا) وقانون بير-لامبرت A = ε·c·l بمسار ضوئي 1 سم؛ لذا قراءة A260 = 1 تقابل 40 ميكروغرام/مل في المحلول المقاس.